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侖昌碩生物? 人組織蛋白酶K（Cath-K）elisa試劑盒???

廈門侖昌碩生物科技有限公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司，目前可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清，動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。公司非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)及企業(yè)平臺的建設(shè)，我們內(nèi)部采用了先進(jìn)的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準(zhǔn)確、有效處理。公司成立之初，立足外貿(mào)，和部分歐美及亞非國的客戶建立了良好的合作，隨著國內(nèi)生物領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展，逐步把重心轉(zhuǎn)移到國內(nèi)來，為每位科研人員獻(xiàn)上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。

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?1. 包被抗原：用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃溫育1小時后，4℃冰箱放置16～18小時。

?2. 洗滌：倒盡板孔中液體，加滿洗滌液，靜放三分鐘，反復(fù)三次，將反應(yīng)板顛倒在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡。

3. 加封閉液200微升，37℃放置一小時。

4. 洗滌同2。

5. 加被檢血清：用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,，每孔200微升。同時作稀釋液對照。37℃放置2小時。

6. 洗滌同2。

7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時。

8. 洗滌同2。

9. 加底物：鄰*二胺溶液加200ml，室溫暗處10--15分鐘。

10. 加終止液：每孔50微升。

11. 觀察結(jié)果：用酶聯(lián)免疫檢測儀記錄450nm讀數(shù)。

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背景:一些實驗已經(jīng)證明在同一載體上構(gòu)建含多個基因的共表達(dá)載體,可提高轉(zhuǎn)染和表達(dá)效率.目的:利用多形上皮黏蛋白(polymorphic epithelial mucin,MUC1)多肽骨架中含有許多連續(xù)重復(fù)系列,構(gòu)建人MUC1重復(fù)序列串聯(lián)體基因與巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony sfimulating factor,GM-CSF)基因重組的真核共表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1( ).MUCI-GM-CSF,并觀察重組質(zhì)粒存COS-7細(xì)胞中的表達(dá).設(shè)計、時間及地點:基因重組體設(shè)計實驗,于2005-09/2006-12在解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)動物中心實驗室完成.材料:真核表達(dá)載體pcDNA3.1( )由英國Taylor-Papadimitriou 教授惠贈.pGEM.3zf(-)-GM-CSF質(zhì)粒、COS-7細(xì)胞、pUC18載體及E.coli DH5 α為自備,雌性BALB/c小鼠由解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供.方法:將信號肽及編碼MUC1基因片段合成、合成的片斷經(jīng)退火等方法獲得MUC1基因重復(fù)序列串聯(lián)體,酶切鑒定及序列分析后,與GM-CSF基因克隆入pcDNA3.1( )真核表達(dá)載體中,構(gòu)建真核共表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1( )-MUC1-GM-CSF.以重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞.主要觀察指標(biāo):通過間接免疫熒光法及ELISA檢測目的基因的表達(dá).結(jié)果:酶切鑒定及序列分析表明,重組質(zhì)粒含有人MUC1重復(fù)序列串聯(lián)體與GM-CSF的融合基因,在COS-7細(xì)胞中可檢測到MUC1表達(dá),重組質(zhì)粒免疫小鼠可誘導(dǎo)產(chǎn)�？笹M-CSF抗體.結(jié)論:成功構(gòu)建了人MUC1基因重復(fù)序列串聯(lián)體與免疫佐劑GM-CSF基因重組成為雙基因多表位抗原的真核共表達(dá)質(zhì)粒.

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??廈門侖昌碩生物科技有限公司 本公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為體的生物技術(shù)公司，目可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清、動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)域。公司非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)及企業(yè)平臺的建設(shè)，我們內(nèi)部采用了先進(jìn)的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準(zhǔn)確、有效處理。公司成立之初，立足外貿(mào)，和部分歐美及亞非國家的客戶建立了良好的合作，隨著國內(nèi)生物域的蓬勃發(fā)展，逐步把重心轉(zhuǎn)移到國內(nèi)來，為每位科研人員獻(xiàn)上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。

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